1.機械因素:
振動與撞擊:色譜柱受到機械振動或撞擊可能產生空隙,導致柱效降低。因此,在使用過程中應避免色譜柱的掉落或柱壓的急劇變化,同時在輸液時不要打開排液閥。
壓力波動:液相色譜儀色譜柱使用過程中的驟然壓力波動也會對色譜柱床層產生影響,導致峰形變差和柱效降低。
2.樣品與流動相污染:
雜質吸附:樣品或流動相中的雜質可能吸附在色譜柱上,導致柱效下降。這些雜質會產生拖尾峰,影響色譜圖的清晰度和準確性。為避免這種情況,可以使用高溶解性溶劑清洗色譜柱,或取出污染填料并裝填新的填料。
篩板堵塞:液相色譜柱入口篩板堵塞會導致柱壓升高、色譜峰拖尾等問題。這通常是由分析樣品中的微粒雜質造成的。因此,在分析前應對樣品進行過濾或離心處理,以減少雜質對色譜柱的污染。
3.填料與濾片問題:
填料堵塞:長時間使用后,高效液相色譜柱內的填料可能因雜質積累而堵塞,影響柱效。此時可以嘗試反向連接色譜柱,使用清洗溶劑以小流量送液進行清洗,或打開柱頭清洗或更換濾片。
填料變性:長時間暴露在不適宜的環境中或受到某些化學物質的侵蝕,可能導致色譜柱填料變性,從而降低柱效。此時需要更換新的色譜柱。
4.溶劑選擇不當:
如果選擇的樣品溶劑與色譜柱固定相之間的相互作用過強,可能導致樣品與溶劑之間難以分離,從而影響柱效。因此,在選擇樣品溶劑時應盡量避免使用高溶解性的試劑。
5.熱、氧與化學損壞:
熱損壞:超出色譜柱的溫度上限會導致固定相和管表面的加速損壞,從而降低柱效。
氧損壞:在高溫下,氧會對色譜柱造成嚴重的損壞。
化學損壞:長時間暴露在化學試劑中,特別是流動相中的某些化學物質可能對柱填料產生損傷,導致柱效下降。
高效液相色譜柱柱效下降的原因多種多樣,需要在使用過程中注意避免機械振動、撞擊和壓力波動等問題;嚴格控制樣品和流動相的質量;定期清洗和更換濾片;合理選擇樣品溶劑;以及注意色譜柱的使用溫度和化學環境等。這些措施有助于延長色譜柱的使用壽命并提高分析結果的準確性。
